淺述液相色譜儀的三大組成系統(tǒng)
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液相色譜儀是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異,如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力,含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面,該固定相與流動(dòng)不相溶。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的組分與固定相相互作用。
下面要為大家介紹的是液相色譜儀的三大組成系統(tǒng):
1、分離系統(tǒng):該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm,內(nèi)徑為2~5mm,由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相。固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點(diǎn),加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬,或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的有機(jī)化合物。因此,這類固定相對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。
2、進(jìn)樣系統(tǒng):一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
3、輸液系統(tǒng):該系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47~4.4X10Pa,流速可調(diào)且穩(wěn)定,當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí),可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),可加快其在柱中的移動(dòng)速度,這對(duì)提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存器和梯度儀,可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值,或改用競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本儀器。